T25細胞到貨處理:
觀察:
1、收到細胞后,請及時核對培養(yǎng)瓶上標(biāo)注的細胞名稱是否與訂購的細胞名稱一致以及培養(yǎng)
瓶是否有破損或漏液等異常情況。
處理:
1、75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。
2、顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存(40x, 100x,200x各一張) 前三天照片為重要售后依據(jù),不提供照片默認收到狀態(tài)良好。
3、不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞放入37度培養(yǎng)箱中靜置3-4小時后再做處理,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
4、收到細胞后,及時查看說明書是貼壁細胞還是懸浮細胞形態(tài),并按常規(guī)貼壁或懸浮細胞的傳代方法操作。
貼壁:未超過80%匯合度時,將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留5ml 完全培養(yǎng)基,放入37°C、5%C02 孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。開始傳代,建議1:2 傳代(兩個T25)。(傳代時建議- 瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基,另外- -瓶用自己配的完全培養(yǎng)基,進行對比培養(yǎng)。)
特殊細胞注意事項:個別細胞貼壁不牢,在運輸過程中發(fā)生細胞脫落,這是正常現(xiàn)象。請將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm 離心5min, 收集上清(后期對比培養(yǎng)使用),沉淀加入胰酶1-2ml, 輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,加1-2ml 完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2 比例進行分瓶傳代(兩個T25),補充新的完全培養(yǎng)基至5-8m/瓶,后放入37"C ,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。.(注意:如收到密封培養(yǎng)瓶,處理完后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)時要將培養(yǎng)瓶蓋子擰松)
說明:
沒有約定送貨日期、時間段,我細胞庫將根據(jù)細胞狀態(tài)自主安排快遞時間,本中心的細胞僅供科學(xué)研究之用,嚴(yán)禁轉(zhuǎn)讓或用于生產(chǎn)。采用此訂購單訂購細胞,睿創(chuàng)生物認為購買者已認可睿創(chuàng)的規(guī)定并遵守此協(xié)議。必要時,本司有權(quán)采取相應(yīng)行動。
